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類器官厚樣本成像,徠卡共聚焦系統解決方案

發布時間:2024/4/9      點擊次數:92

自21世紀(ji)初,隨著(zhu)干細胞(bao)研究和組織工程的重大突(tu)破,類器官及(ji)其在顯微成像中的應用取得了顯著進展。已(yi)開發(fa)的多種(zhong)類(lei)器(qi)官模型(xing),如(ru)大腦、肝臟和(he)腸道類器官(guan),為研究(jiu)器官(guan)發育、疾病機制揭(jie)示及治療(liao)評估提供了新途(tu)徑。同(tong)時(shi),類(lei)器官成像(xiang)技術的發(fa)展極大地促進了(le)研究人員對這(zhe)些復(fu)雜三維結構(gou)細節動態模式進行觀察(cha)的能力。盡(jin)管如此,類器官研究仍面臨個(ge)挑戰,包括維持樣本活性確保成像深度分辨率,及處理分析大量(liang)數(shu)據的需求(qiu)


共聚焦顯微鏡(jing)物(wu)鏡(jing)的(de)發(fa)展,特別(bie)是用(yong)于觀察厚樣(yang)本(ben)的(de)物(wu)鏡(jing),對匹配樣(yang)本(ben)和(he)周圍介質的折射率至關(guan)重要,否則會影響成像深度。高(gao)數(shu)值孔(kong)徑的油浸物鏡雖然(ran)提(ti)供高(gao)分辨率,但當用于(yu)水(shui)樣(yang)本時由于(yu)折射(she)率不匹配而(er)面臨限制(zhi),導致球(qiu)面像差。這影(ying)響了能(neng)夠有效成像的樣本深(shen)度,并降低了(le)圖像質量


為了解(jie)決這些挑戰,研(yan)究人員開始使(shi)用甘油作為(wei)一種折(zhe)射(she)率接近生物樣本的介質,將樣本置于甘油中,并使用甘(gan)油物鏡進(jin)行成像。隨著技術(shu)的(de)進(jin)步(bu),甘(gan)油物鏡(jing)的(de)設計和性能(neng)不斷改進(jin),成為(wei)現(xian)代顯微鏡(jing)中常(chang)見的物鏡類(lei)型之一。


如今,大多數固定樣本都使用基于甘油的Mowiol、Vectashield或類似混合物進行封片。這些介質的折射率接近80/20甘油/水混合物的折射率(ne=1.45)。甘(gan)油物鏡(介(jie)質(zhi)折射率(lv)1.46)是在這種介(jie)質(zhi)中封裝的樣本的更佳選擇。


由于折射率匹配,甘油物鏡減(jian)少(shao)了(le)散射(she)和光損失,在泛的(de)波長范(fan)圍都具有較好的透明度,提高了圖像質量和信號強度,因此可實現更(geng)深(shen)的成像深(shen)度




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